Який принцип MitoTracker orange?
Теоретично, потрапивши всередину мітохондрій, барвник зв’язується з мітохондріальними білками, що призводить до флуоресценції зонда з інтенсивністю, пропорційною концентрації барвника в мітохондріях, таким чином візуалізуючи масу та морфологію мітохондрій (Chazotte, 2011). ).
Зонди MitoTracker пасивно дифундують через плазматичну мембрану, а потім накопичуються в активних мітохондріях залежно від потенціалу.. Згодом він ковалентно зв’язує тіольні групи залишків цистеїну мітохондріальних білків (Chazotte, 2011).
MitoTracker® Deep Red зв'язує тіолреактивні хлорметильні групи в мітохондріальній мембрані та зберігається після фіксації клітин, тоді як MitoTracker® Green зв’язує вільні тіольні групи залишків цистеїну, що належать до мітохондріальних білків, і може використовуватися лише з нефіксованими клітинами.
Мітохондрії відіграють вирішальну роль у виробленні метаболічної енергії в еукаріотичних клітинах. Як було розглянуто в розділі 2, вони є відповідає за більшу частину корисної енергії, отриманої від розщеплення вуглеводів і жирних кислот, яка перетворюється на АТФ в процесі окисного фосфорилювання.
Сигнал залишається для до 24 годин після фіксації. Примітка: не фіксуйте клітини перед фарбуванням MitoTracker®.