Яку функцію виконує тубулін у вестерн-блоттингу?
Бета-тубулін зазвичай використовується як контроль навантаження для Вестерн-блоттингу для нормалізації виявлених рівнів білка шляхом підтвердження того, що білкове навантаження є однаковим у всьому гелі. OriGene пропонує високоякісні анти-
mAb миші (контроль завантаження) для вестерн-блоттингу.
Висококонсервативні гетеродимери α- та β-тубуліну збираються в динамічні мікротрубочки та виконують численні важливі клітинні функції, такі як структурна підтримка, шлях для транспорту та генерування сили в поділі клітини.
Тим не менш, β-актин і β-тубулін мають певні переваги як засоби контролю навантаження: вони висококонсервовані, демонструють високий рівень експресії та демонструють стабільність у більшості експериментальних умов.
Сімейство генів тубуліну в основному експресується в постмітотичних нейронах під час коркового розвитку зі специфічним просторовим і часовим паттерном експресії. Члени цієї родини кодують димерні білки, що складаються з двох тісно пов'язаних субодиниць (α і β), що представляють основні складові мікротрубочок.
α-тубулін конститутивно зв'язаний з гуанозинтрифосфат (GTP) у своєму негідролізуючому та необмінному «N-сайті», тоді як β-тубулін зв’язується з GTP і GDP і швидко обмінюється на його обмінному «E-сайті», де GTP може бути гідролізований у GDP (Jacobs et al., 1974). ; Brylawski and Caplow, 1983).
Мікротрубочки визначають положення оточених мембраною органел і направляють внутрішньоклітинний транспорт. Актинові нитки визначають форму поверхні клітини і необхідні для пересування всієї клітини (панель 16-1). Але самі по собі ці цитоскелетні філаменти були б неефективними.