Що станеться, якщо ви додасте забагато праймера до КПЦР?
Додано забагато праймера Використання високої концентрації праймерів може збільшити ймовірність зв'язування праймерів з неспецифічними сайтами на шаблоні або один з одним. Використовуйте добре розроблені праймери з концентрацією 0,2–1 мкМ у кінцевій реакції.
Використання занадто великої кількості праймера може спричинити відчуття засмічення та покриття шкіри. Однією з головних переваг праймера є гладка поверхня шкіри для рівномірного нанесення макіяжу. Якщо ви нанесли забагато, ви можете помітити, що основа схоплюється або злипається на певних ділянках.
Забагато шарів або надмірно товстий шар підвищує ризик розтріскування, тріщин або відколів грунтовки.
І праймери, і цільова послідовність можуть впливати на ефективність і специфічність ампліфікації, а отже, і на точність аналізів кПЦР..
Під час ПЛР праймери приєднуються до матричних ланцюгів ДНК і служать відправною точкою для синтезу ДНК. Надлишки грунтовок додаються щоб переконатися, що є достатньо праймерів для зв’язування з матричними ланцюгами ДНК, навіть якщо деякі праймери зв’язуються з нецільовими послідовностями або якщо деякі праймери з часом деградують.
Було додано забагато праймера. Використання високої концентрації праймерів може збільшити ймовірність зв'язування праймерів з неспецифічними сайтами на матриці або один з одним. Використовуйте добре розроблені праймери з концентрацією 0,2–1 мкМ у кінцевій реакції. Крім того, переконайтеся, що виробник надав правильну концентрацію.