Яка процедура імуноферментного аналізу?
    • Головна  > Українцям  > 
    • Яка процедура імуноферментного аналізу?

      • Яка процедура імуноферментного аналізу?

      Етапи проведення сендвіч-тесту ELISA А мікропланшет

      мікропланшет

      Мікропланшет, також відомий як мікропланшет, мікропланшет або мультилунковий планшет плоска пластина з кількома «ямками», які використовуються як маленькі пробірки. Мікропланшет став стандартним інструментом у лабораторіях аналітичних досліджень і клінічних діагностичних випробувань.

      https://en.wikipedia.org › wiki › Мікропланшет

      шайба використовується для змивання неспецифічного матеріалу в лунках, а абсорбція ELISA мікропланшетний рідер

      планшетний рідер

      Зчитувач мікропланшетів, який може виявити два або більше застосувань вважається багаторежимним зчитувачем планшетів. Зазвичай система може виявляти абсорбцію, люмінесценцію, флуоресценцію та навіть проводити більш спеціалізовані вимірювання флуоресценції, як-от флуоресценція з роздільною здатністю у часі (TRF) і поляризація флуоресценції (FP).

      https://www.moleculardevices.com › багаторежимні зчитувачі

      виявляє зміну кольору, викликану присутністю цільового антигену. Для побудови стандартних кривих і розрахунку результатів використовується програмне забезпечення для зчитування планшетів.

      Імуноферментний аналіз (ІФА) — метод, заснований на взаємодії антитіла з антигеном. Зазвичай цільово-специфічні антитіла іммобілізують на поверхні (наприклад, багатолунковий планшет), а досліджувану речовину інкубують на цій поверхні та промивають, а потім спостерігають колориметричну реакцію.

      Процедура непрямого ІФА Первинний зразок антитіл додають до планшета та інкубують з антигеном. Планшети промивають PBS для видалення незв'язаних молекул. Вторинне антитіло, кон’юговане з ферментом, додається та інкубується з антигеном. Лунки промивають для видалення незв'язаних молекул.

      Ключові поняття та резюме. Імуноферментний аналіз (ІФА) використовується для візуалізації та кількісного визначення антигенів. Вони використовувати антитіло, кон'юговане з ферментом, щоб зв'язати антиген, і фермент перетворює субстрат на спостережуваний кінцевий продукт. Субстратом може бути або хромоген, або флуороген.

      Сендвіч-протокол ІФА

      1. Етап 1 – Пробопідготовка.
      2. Етап 2 – Додавання антитіла захоплення.
      3. Етап 3 – Покриття та блокування антигену.
      4. Стадія 4 – інкубація антитіл.
      5. Етап 5 – Виявлення.
      6. Етап 6 – Аналіз даних.

      Аналіз: Встановіть спектрофотометр на 256 нм і 25°C. Внесіть піпеткою в кварцові кювети суміш 1,5 мл трис/HCl буфера та 1,4 мл субстрату (BTEE), перемішайте перевертанням та інкубуйте в спектрофотометрі при 25°C протягом 3-4 хвилин для досягнення температурної рівноваги.